糞便的化學(xué)檢查有酸堿度反應(yīng)、隱血試驗(yàn)、膽色素和脂肪測(cè)定等，其中隱血試驗(yàn)有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值，上消化道出血量

小于5ml，糞便中無可見的血液，且紅細(xì)胞破壞，顯微鏡檢查也未見紅細(xì)胞，而需要用化學(xué)法、免疫法、轉(zhuǎn)鐵蛋白法、

血紅蛋白熒光測(cè)定法等才能證實(shí)的出血，稱為隱血，檢查糞便隱血的試驗(yàn)稱為糞便隱血試驗(yàn)(fecal occult blood test ,

FOBT)，化學(xué)法常用試劑有鄰聯(lián)甲苯胺、匹拉米洞、愈創(chuàng)木脂、無色孔雀綠、米土爾等。                  

隱血定性檢測(cè)試劑盒(鄰聯(lián)甲苯胺法)的檢測(cè)原理是血紅蛋白中的亞鐵血紅素具有類似過氧化物酶的活性

，能催化H2O2作為電子受體使色原底物鄰聯(lián)甲苯胺氧化成鄰甲偶氮苯而顯綠色→藍(lán)色，其顏色深淺與血紅蛋白含量成正比

，根據(jù)顯色的快慢可以半定量血紅蛋白即隱血含量，因此也可稱作糞便隱血半定量試驗(yàn)，多用于人或動(dòng)物糞便血紅蛋白檢查

，應(yīng)注意的是正常人或動(dòng)物消化道也會(huì)微量出血或受到刺激后出血或模型動(dòng)物飼料含有魚粉、鐵劑等，都可能導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果

出現(xiàn)假陽性，本法特點(diǎn)是靈敏度高、假陽性高，可檢出Hb 0.2~1.0μg/ml，可聯(lián)合使用中靈敏度、中特異性的匹拉米洞法

。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考)：

1、取內(nèi)徑為8mm的玻璃試管2支，分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml。

2、靜脈采血1ml，立即取下針頭，沿管壁向各試管注入血液0.5ml，立即混勻并啟動(dòng)秒表計(jì)時(shí)，并置于37℃水浴中。

3、每隔10s輕搖試管一次，觀察管內(nèi)血液流動(dòng)情況，直至血液凝固。記錄血液凝固所需時(shí)間，即為ACT。

4、取2支試管血液凝固時(shí)間的平均值作為ACT 值。

計(jì)算：參考區(qū)間： (1.77±0.76)min

4、配制標(biāo)準(zhǔn)品工作液︰如果檢測(cè)血清、尿液等樣品，按取丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml):蒸餾水=1：99的比例配制，使?jié)舛冗_(dá)到60μg/ml，如果檢測(cè)組織樣品按丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制，使?jié)舛冗_(dá)到60μg/ml。

注意事項(xiàng):

1、實(shí)驗(yàn)材料應(yīng)盡量新鮮，如取材后不立即使用，應(yīng)存于-20°C.

2、實(shí)驗(yàn)用蒸餾水不能含有二氧化碳，可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水，并蓋緊口。

3、TA滴定液為堿性溶液，有腐蝕性，請(qǐng)小心操作。

4、TA標(biāo)定液容易長菌，宜4℃保存，一旦發(fā)現(xiàn)有絮狀物請(qǐng)棄用。

5、果實(shí)中含酸量較少時(shí)可將TA滴定液適當(dāng)稀釋后使用，可考慮用0.01~0.05M  TA滴定液進(jìn)行滴定。

6、TA滴定液含量計(jì)算公式中，V0最好為3次空白測(cè)定的平均值。

7、如果所測(cè)樣品的濃度過高，應(yīng)用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測(cè)定，并將稀釋倍數(shù)帶入公式。

8、如果樣品顏色較深，滴定終點(diǎn)不易觀察，應(yīng)采用電位滴定法。

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